Validação do método de quantificação de midazolam em matriz biológica para determinação de capacidade inibitória do protótipo LQFM018 sob enzimas CYP3A

Resumo

O protótipo de fármaco antineoplásico LQFM018 foi sintetizado no Laboratório de Química
Farmacêutica Medicinal e foi selecionado para passar por testes pré-clínicos farmacocinéticos e
avaliação de possível interação medicamentosa com medicamentos. Como a subfamília de enzimas
hepáticas CYP3A é responsável pela biotransformação de pelo menos 50 % dos fármacos
conhecidos, esta foi selecionada para os testes de inibição enzimática com o protótipo em questão. O
objetivo deste trabalho foi validar um método de quantificação de midazolam por HPLC UV-VIS para
avaliar a quantidade de midazolam metabolizada por enzimas hepáticas CYP3A extraídas de fígado
de ratos Wistar na presença e ausência da substância teste LQFM018. Método: HPLC Shimadzu®
Autosampler com bomba quaternária. Coluna: C18 250 mm x 4.6 mm x 5 µm Shim-pack, Shimadzu®.
Detecção em 230 nm. Fase móvel: acetonitrila, metanol e água ultrapurificada (20:40:40 v/v), sob o
fluxo de 1,0 mL/min. Volume de injeção 20 µL. O método testado demonstrou ser seletivo/específico,
limites de detecção e quantificação de 50 e 200 ng/mL, respectivamente. O método não demonstrou
efeito residual ou efeito matriz. O coeficiente de correlação linear para a faixa testada esteve acima
de 0,99. O método demonstrou ser útil para quantificação de midazolam extraído da matriz biológica
testada.