Avaliação da capacidade de metabolização in vitro de enzimas microssomais CYP3A extraídas de fígado de ratos Wistar

Resumo

Este trabalho deverá testar a viabilidade de enzimas microssomais extraídas de fígados de ratos
Wistar quantificando a sua capacidade de metabolização em presença do substrato midazolam
(fármaco modelo para a subfamília CYP3A) e do inibidor cetoconazol. Com a determinação da
viabilidade das enzimas extraídas será possível avaliar a influência de qualquer substância na
atividade desta subfamília, visto que, em farmacocinética, é sabido que qualquer substância em
potencial pode ter influência sobre o metabolismo de fármacos ao inibir as enzimas responsáveis pelo
metabolismo destes. O objetivo deste trabalho é testar a viabilidade de enzimas microssomais da
subfamília CYP3A extraídas de fígados de ratos Wistar. Primeiramente foram reunidos midazolam,
NADPH e lisado hepático para ser observada a metabolização do midazolam. Em seguida, foram
adicionados midazolam, NADPH, lisado hepático e cetoconazol para ser observada a inibição da
metabolização do midazolam. A área do pico de midazolam no primeiro teste demonstrou ser menor
que no segundo, o que comprova que realmente as enzimas CYP3A estão ativas no lisado e podem
ser inibidas por substâncias que apresentem essa capacidade. Este protocolo demonstrou sua
viabilidade e poderá ser usado para avaliar a capacidade de inibição de novos protótipos de
fármacos.