Expressão e purificação de efetores TAL artificiais para estudos de interação proteína-DNA

Resumo

A expressão e purificação de proteínas é uma técnica que possibilita a realização de
estudos funcionais e estruturais, além de permitir o emprego de proteínas em diferentes áreas da
pesquisa e do setor produtivo. Os efetores ativadores de transcrição (transcription activator-like ou
TAL) são proteínas que atuam como fatores de transcrição. Muito embora o exato mecanismo da
ativação transcricional ainda permaneça desconhecido, os efetores TAL vem sendo utilizados como
uma importante ferramenta molecular na manipulação genética de diferentes organismos. Neste
sentido, os efetores apresentam uma aplicação biotecnológica. O objetivo do presente trabalho é
promover a expressão dos efetores TAL visando estudar seu mecanismo de ação que promove a
ligação em sítios promotores e ativação de genes específicos. Para isso a primeira etapa consistiu em
alguns passos de clonagem. A região de ligação de DNA do efetor TAL foi sintetizada e clonada em
um vetor de expressão, gerando um efetor TAL artificial com especificidade de ligação a um gene
chave na via de biossíntese do etanol. A segunda etapa, ainda por realizar, consiste na expressão
deste efetor para posteriormente realizar estudos funcionais. Este estudos serão essenciais para a
entender o processo de transativação de genes utilizado pelos efetores TAL.